牛冷冻精的保存及使用

　　****冷冻保存是将****进行特殊处理，保存在超低温下，以达到长期保存的目的。通常采用液氮（—１９６℃）和干冰（—７９℃）保存。其最大优点是可长期保存，使用不受时间、地域以及种用雄性动物寿命的限制。可充分提高公牛的利用率。现将冷冻****保存起来和怎样进行解冻及给母牛输精的有关技术操作介绍如下，供参考。
一、稀释液的配方：
　 １２％的蔗糖液７５毫升、甘油５毫升、卵黄液２０毫升。
二、稀释方法：
　　 将经过检查合格的****（活力０•６以上、精子密度中等）按１：２—５倍稀释液进行稀释，其稀释原则应保证每个颗粒****中所含精子数不少于３０００—４０００万个，解冻后呈直线前进运行的精子不少于１５００万个。
三、冷冻：
　 在装有液氮的容器上置一铜纱网，距液氮面２厘米左右，使温度维持在—８０℃至—１００℃。将平衡后的****用滴管按一定量（０•１毫升）滴于铜纱网、滴完最后一滴停３—５分钟后，当****颗粒颜色变白时，立即浸入液氮，并将全部颗粒取下，收集于贮精瓶或纱网布袋内，并做好标记，然后立即移入液氮罐中贮存。
四、解冻：
　 将预先配制好的２•９％柠檬酸的溶液１毫升，放入干净的小试管中，再置于４０℃左右的温水杯中，迅速取颗粒冷冻****１粒放入试管。轻轻摇动至化冻时，从水杯中取出试管，接着检查****活力，不低于０•３即为合格品。
五、重视保精、快速解冻与镜检
１、根据液氮罐的性能要求，定期添加液氮罐内盛装冻精的提筒不能露在液氮面外。
２、取精时，尽可能用长镊子，切勿将提筒或纱布袋提到临界线以上处（罐顶１０厘米左右）。
３、从液氮中取出细管冻精时，要轻轻甩１—２下，将塑料细管的棉塞端放入３５—４０℃的温水中，把封口端留在水外１—１•３厘米外，待管内****融化一半时，立即取出备用。
４、解冻后的****镜检时，精子的活力不低于０•３方可用于输精，才能确保正常受精。
５、解冻后的****应立即输配，不宜停放时间过长，应做到现解冻、现输精。
六、适时输精
　　 母牛正常排卵是在发情结束后６—１２小时，精子在母牛生殖道的存活时间为１２—２０小时，且还需要４—６小时的获能过程，才能与卵子结合受精。精子１５分钟就会到达输卵管受精部位，因此，让精子早于卵子到达输卵管受精部位是提高受胎率的先决条件。
１、适宜的输精时间：是在母牛的发情后期。此时母牛表现：精神平稳，外阴部肿胀消失，****不再流出透明液体。直肠检查卵泡胀大，表面紧张，有一触即破之感。此时为最佳输精时机。
２、适宜的输精部位：是在子宫颈内口１厘米处即子宫体基部，过浅易导致****外流，过深易损伤子宫内粘膜。
３、适宜的输精方法：直肠把握子宫颈输精法。将母牛保定，左手插入母牛直肠轻轻握住子宫颈后端，右手将输精器自阴门向斜上方缓慢插入５—１０厘米（以避开尿道口）再改为平插送到子宫颈口，缓慢越过子宫颈管中的皱壁，到达子宫颈基部，徐徐注入****后，缓缓抽出输精器。
４、适宜的输精次数：以１—２次为宜。可在发情母牛发情高潮后，黄牛在发情高潮后６—１２小时，水牛在发情高潮后１８—２０小时进行第一次输精，前后间隔８—１２小时再进行第二次输精。